对照品的标定方法及注意事项

　　一、 对照品的标化

　　对照品的质量直接影响到检验样品的结果。因此，对照品的标化十分重要，中国药品生物制品检定所为此制定了严格的标化程序。

　　首先应根据中国药典或卫生部标准，参考USP，BP，JP等国外 药典，查阅Merk Index等资料 确定对照品的标化项目和检验方法。

　　1、标化内容包括：

　　(1)物理常数的测定

　　1)熔点：依药典方法进行，取三次测定的平均值加温度计的校 正值。熔点现象不易观察的品种加作DSC熔点测定。

　　2)比旋度：按药典规定的方法测定，空白左右分别测定3次，样 品左右分别测定5次，计算平均值。

　　3)吸收系数(E： )值：测定时要求平行两份样品，每份样品按两 个浓度(药典浓度±10％)进行测定。

　　2、纯度考察

　　重点用薄层色谱法和高效液相色谱法两种方法作“有关物质” 检查：

　　1)薄层色谱法：要求两个展开系统，显色灵敏度要达到检测量 的0．1％ ～0．2％。对照液的点样量为梯度，样品液的点样量为药典量 和药典的加倍量。实验的结果要报出样品的Rf值、杂质的量。当杂 质的量较大时，要用双向展开的方法确定样品是否分解。

　　2)高效液相色谱法：要求两种流动相或不同型号的两根柱子， 最小检出量要达到检测量的0．1％ ，进样量为药典量和药典量的加 倍量，进行二极管阵列检测峰纯度，用归一化法或主成分自身稀释 对照法计算杂质量。

　　3、含量测定

　　要求用两种方法测定含量。一般为容量法和色谱法。容量法要 求两人分别测定3～5份。每人的平行实验结果以及两人的实验结 果的相对偏差均应小于0．3％。高效液相色谱法需用3种浓度作校 正因子，精密度要求尼 小于1．5％。若用分光光度法测定含量，必 须用对照品法，E值法只能作参考。含量测定用的化学对照品还要 求作DSC纯度测定。

　　4、对照品的发放与供应

　　中国药典的凡例规定，标准品与对照品(不包括色谱用的内标 物质)均由国务院药品监督管理部门指定的单位制备、标定和供 应 ]。我国药品国家标准物质是由国家药品监督管理局授权中国药品生物制品检定所统筹规划、制备和分发的。

　　标准品与对照品发放时应附有质量要求、含量、用途、使用效期 和装量等使用说明。中国药典(二部)附录列出了药典标准中常见的 标准品与对照品名单，可供查阅和订购。

　　5、对照品的保存和使用

　　应注意以下几点：

　　(1)对照品应按说明书规定的条件妥善保存，一般置于燥阴凉 处保存，某些对照品如维生素E等需避光低温保存。要注意对照品 的使用期限，过期、变质的对照品不宜再使用。

　　(2)使用对照品时，应严格按说明书执行。一般情况下，供鉴别、 检查用的对照品不能用于含量测定。红外鉴别用的对照品使用时应 注意与样品在晶型上的差异，必要时可采用相同的方法对样品和对 照品重结晶。例如氨苄西林钠具有多种不同的晶型，可用丙酮对样 品和对照品重结晶后测定，以确保二者晶型和红外光谱图的一致0】。

　　(3)除另有规定外，对照品使用时应采用适宜的方法测定其水分的含量，按干燥品(或无水物)进行计算后使用，否则会造成含量 测定结果偏高。对热稳定的对照品可直接干燥后使用；对热不稳定 的对照品可同时另取一份作干燥失重，扣除水分后使用 。此外，对 照品若含有结晶水或盐基，使用时应注意其换算。

　　(4)由中国药品生物制品检定所提供的对照品或国际对照品为 法定对照品，以法定对照品作对照标化的原料可称为二级对照品或 工作对照品。药品生产单位为节约成本，可使用工作对照品进行日 常检验，但药品检验所必须使用法定的对照品，出具的检验报告书 才具有法律效力。